dot dot
dot
วิธีการ COAT SLIDES เพื่อใช้ในงาน IMMUNOHISTOCHEMISTRY
dot
bulletวิธีการ COAT SLIDES
bulletอุปกรณ์และน้ำยาที่ต้องเตรียม
dot
ความรู้เบื่องต้นทางด้านอิมมูโนพยาธิวิทยา
dot
bulletอิมมูโนพยาธิวิทยา (Immunohistochemistry)
bulletการเตรียมตัวอย่างเพื่อศึกษาทางอิมมูโนพยาธิวิทยา
bulletProtocol การย้อม Immunohistochemistry
bulletสรุปขั้นตอนการย้อม IHC โดยใช้ EnVision kit เป็น detection System
dot
Flow Cytometry Research Reagents
dot
bulletFlow Cytometry Research Reagents
dot
Apoptosis Kits
dot
bulletApoptosis Kits
dot
คำถาม

dot




สรุปขั้นตอนการย้อม IHC โดยใช้ EnVision kit เป็น detection System

 

สรุปขั้นตอนการย้อม IHC โดยใช้ EnVision kit เป็น detection System

DRY SLIDES                                                                                                        Imprint/Cytology Smear Slide

ß                                                                           ß

DEPARAFFINIZATION AND REHYDRATION                                                                 Air Dry

ß Xylene 3 นาที x3                                                                                              ß

ß Absolute ethanol 3 นาที x 2                                             fix0.1%Formal Saline 30 นาที - 2ชั่วโมง

ß 95% ethanol 3 นาที x 2 running ลงน้ำกลั่น 5 นาที                                ß ล้างน้ำกลั่น

ANTIGEN RETRIEVAL TECHNIQUE  - - - - - - - - - -- -- -- -> ช่วงต่อของขั้นตอนใน  Cytology Smears

ß TRS  : TE buffer, pH 9.0

    MW : High power 5 นาที + low power 10 นาที ทิ้งให้เย็นที่ RT 20 นาที (เป่าพัดลมช่วย) *

                Running น้ำประปา 1 นาที แล้วลงน้ำกลั่น                           

ß เช็ดรอบ section แล้ววงด้วย Pen for IHC แล้วลงน้ำกลั่น

ENDOGENEOUS PEROXIDASE BLOCKING

ß 3% H2O2 ในน้ำกลั่น (30% H2O2 1 ml + DW 9 ml เป็นเวลา 10 นาที) **

     Running น้ำประปา 5 นาที

WASH BUFFER

ß Wash buffer 5 นาที x 2 *** (dilute c-erb-B2)

NON-SPECIFIC PROTEIN BLOCKING

ß Proteins block serum free X0909 10 นาที   เคาะออก

PRIMARY ANTIBODY

ß Primary Antibody Ready- to-use หรือ Negative Control Reagent (diluent)

     Incubate 30 นาที ****(เตรียมDAB)

WASH BUFFER

ß Rinse ด้วย Wash Buffer และล้างด้วย Wash Buffer 5 นาที x 2

VISUALISATION SYSTEM

ß EnVision kit  15 นาที *****

WASH BUFFER

ß Wash buffer 5 นาที x 2

                                SUBSTRATE-CHROMOGEN

                             ß DAB liquid 5 นาที 

                                STOP REACTION

                             ß Running น้ำประปา 10นาที แล้วลงน้ำกลั่น

                                COUNTERSTAIN

                             ß Mayer’s Hematoxylin 2 นาที - - - - - - - >  Running น้ำประปา 5 นาที

                                                DEHYDRATE -CLEAR –MOUNT

สรุปการย้อม Frozen section โดยใช้ EnVision kit







Copyright © 2010 All Rights Reserved.